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16 Cartas en este set
- Frente
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Proceso
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Obtención y/extracción del DNA
PCR electroforesis |
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Medios físicos
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Lisos, térmica, shock térmico,
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Medios enzimaticos
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Hongos (liticasa’
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Temperatura ura
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-20 grados: amplificaciones en un tiempo
4 grados: inmediato |
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PCR
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obtener un gran numero de copias de un fragmento de DNA específico
1. DNA O RNA 2. Buffer x10 amortiguador 3. MgCl2 cofactor enzimatico 4. dNTP’s bases nitrogenadas 5. Primera secuencia marca donde inicia la reacción 6. Polimerasa enzima 7. Agua completa el volumen |
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Termociclador
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30-35 ciclos
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Recomendaciones
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Control negativo: toda la reacción más agua
Control positivo: muestra conocida |
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Electroforesis
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Se hace gel, se solidifica y se agrega la muestra en cada pozo
Control interno: betaglobina VPH gen L2 |
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Gen más utilizado para bacterias
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16s RNA
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PCR SEMI ANIDADA
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2 PCR aumenta sensibilidad y especificidad. Genoma muy grande, va dirigido a un pequeño fragmento
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PCR TRANSCRIPTASA REVERSA
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Zika, dengue, fiebre amarilla
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PCR MÚLTIPLE
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Varios microorganismos en una muestra (tipos de herpes)
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PCR RFLP
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Restricción de fragmentos, cortan el DNA, indican genotipo
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PCR TIEMPO REAL
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Útil en carga viral para cuantificar, fluorocromo
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Secuenciacion
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Identificar que organismo es
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Genotipificación
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Para saber que cepa es
Para el tratamiento, vacuna Afinidad de cepas Epidemiologia |
