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Prueba de Catalasa: peróxido de hidrogeno en oxigeno
molecular y agua.

microorganismos expuestos a oxígeno.

Para indentificar coco gram positivos.

Staphylococcus spp y micrococcus


Catalasa negativos: Streptococcus spp

Streptococcus (catalasa -) de Micrococcus (catalasa +) y/o Staphylococcus (catalasa
+). Bacillus (+) de Clostridium (-). Lysteria monocytogenes (+) y/o Corynebacterium
(+, con las excepciones de las especies C. pyogenes y C. haemolyticum, ambas -) de
Erysipelothrix (-)
Prueba de Catalasa (inmediata)
La citocromo oxidasa es el último eslabón en la cadena transportadores de electrones en organismos
que realicen respiración aerobia.

Reactivo Kovacs reducido (Incoloro). En presencia de Coxidasa (AZUL) oxidado

Indentificar AEROBIOS ESTRICTOS

Citocromo oxidasa positivo: bacilos gram- no fermentadores: Pseudomonas, neisseria y campylobacter. Moraxella +

C oxidasas negativos: enterobacteriaceae. Las enterobacterias son las típicas oxidasa negativa

Neisseria (+),
Citocromo oxidasa (inmediata)
La prueba de la coagulasa se usa para diferenciar el Staphylococcus aureus de los Staphylococcus coagulasa negativos.

coagulasa positivo indica que la muestra contiene Staphylococcus aureus


staphylococci coagulasa negativo de relevancia clínica: S.saprophyticus, S.epidermidis
Prueba de la coagulasa (lectura rápida 6h)
La ureasa en una enzima que cataliza la hidrolisis de la urea hasta amoniaco y dióxido de carbono.

fenolftaleína: aumenta pH (se pone rosado)

agar de Christensen: especies que
producen menos amoniaco como bordetellas, brucellas, klebsiellas y enterobacter.

caldo de Stuart: proteus spp

Negativo: color amarillo
Prueba de la Ureasa (lectura rápida 6h)
Bacterias indol positivo: e. coli, citrobacter spp, aeromonas hydrophila

Bacterias indol negativas: salmonella spp, proteus spp, enterobacter spp, klebsiella spp.
Prueba Indol (Lectura rápida 6h)
Existen dos tipos de metabolismo: oxidativo y fermentativo

El oxidativo es el que utiliza el oxigeno como aceptor final de electrones. Este tipo de metabolismo lo
poseen los aerobios estrictos y los anaerobios facultativos.
La fermentación es un proceso anaeróbico, que se lleva a cabo en microorganismos anaerobios
estrictos, anaerobios facultativos o aerotolerantes. El receptor de electrones es el NADH.


El piruvato tiene varios destinos como lactato, butirato, etanol, acetoina
Prueba Lentas 18 a 48h
Composición del medio de Hugh-leifson: Agar, peptosa, glucosa, azul de bromotimol. I

Inicialmente el medio es verde, cuando se forman ácidos bien sea por vía oxidativa o fermentativa el pH
disminuye y el azul de bromotimol pasa de ser verde a amarillo

diferenciar las enterobacterias de aquellas bacterias que no son
fermentadoras de glucosa


O+/F-: Aerobio:
O-/F+: Anaerobio estricto:
O+/F+: Anaerobio facultativo:
Prueba de oxidación/ fermentación 18 a 48h
ROJO METILO + : Escherichia coli. Salmonella. Citrobacter. Proteus

VP + : Klebsiella y Enterobacter



butilenglicol (klebsiella, enterobacter): (Acetilmetilca) Aceitona.. ácidos mixtos (e. coli)

Acidos (ácido láctico, ácido acético, ácido
fórmico), o productos finales neutros (acetil metil carbinol).


El medo utilizado es un caldo MRVP para ambas pruebas

Voges Proskauer: (productos neutros) acetoina se convierte en diactetil: que en presencia de alfa-naftol y KOH: Rojo (+)

Rojo de metilo: acidos mixtos (lactato, acido fórmico, etc). Ph ácido (4) ROJO (+) rojo metilo 5 gotas
Prueba de rojo de metilo / Voges Proskauer 18 a 48h
citrato como única fuente de carbono,
fosfato monoamónico es la única fuente
de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. citrato permeasa, a través del ciclo del ácido tricarboxílico. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen
a ácidos orgánicos que al ser utilizados como fuente de carbono,
producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.

Reactivo: Citrato de Simmons. (contiene azul de bromotimol indicador pH). Consumo de citrato , se genera productos metabólicos alcalinos. Aumento de PH

AZUL: POSITIVO: Klebsiella spp. Citrobacter. Salmonella. Serratia. Pseudomonas

VERDE: NEGATIVO: E. coli. Shigella
Prueba de Citrato (18 a 48h)
S de azufre, I de Indol y M de movilidad. misma que indol

Para evaluar la parte del acido sulfhidrico: este medio tiene tiosulfato: egradacion de algunos compuestos
azufrados forma H2S o acido sulfihdrico
gaseoso, que reacciona con el citrato
de amonio ferrico y forma un
precipitado ***** insoluble. SALMONELLA

Movilidad: cuando hay turbidez... se mueve la colonia

E coli: Motidad +, H2S -, indol +
Staphylococcus aureus: Non motile, H2S -, indole -
Salmonella: mobile, H2S+, indole -
Enterobacter aerogenes: motile. H2S- , INDOLE-
MEDIO SIM (18 a 48h)
Movilidad, indol, ornitina

Ornitina: se evalua la presencia de la enzima
descarboxilasa de ornitina.. El producto de la
metabolizacion de la ornitina se comoce como
putrescina, ella pasa el medio de amarillo a morado,
lo que implica que la prueba es positiva

Para evaluar Morganella morgagni. Proteus mirabilis, E coli, Klebsiella pneumoniae
MEDIO MIO (LECTURA lenta 18 a 48h)
Eschericha coli (es la mas representativa de las enterobacterias)
Es indol positiva, rojo de metilo positiva, voges proskauer negativa,
citrato negativa


Klebsiella pneumoniae (tambien es enterobacteria)
En medio SIM
Indol negativo, rojo de metilo negativo, voges proskauer
positivo, citrato positivo
Pruebas IMVIC 18 a 48h