Ziehn Nielsen	Para BAAR Limitante: no da género, especie ni carga bacteriana Requiere 10,000 bacterias/ml para dectectarlas
Diagnósticos moleculares para Tb	Gen expert: identifica Tb y resistencia a rifampicina PCR tiempo real: tarda 2 hr, diagnóstico confirmatorio Cultivo tarda 8 hr
Observación al microscopio	KOH; micobacterias Tinta china: cualquier microorganismo que tenga cápsula (Cryptococcus neoformans o gatis) en inmunosuprimidos
MÉTODOS FENOTÍPICOS	Solo identifican género y especie
Microscopía de campo oscuro	Treponema Pallidum
Microscopía de fluorescencia	Cuando microorganismo es muy pequeño (Chlamydia) Directa: antígenos Indirecta: anticuerpos
Microscopía electrónica	Virus (ocupa mucha carga viral)
Tinción de Gram	Se basa en la morfología celular bacteriana (inmediata para dar antibiótico)
GRAM positivos	Pared gruesa Peptidoglucanos y ácido teicoico
GRAM negativos	Pared delgada Sólo peptidoglucano Membrana exterior de fosfolípidos y lipoproteínas
Proceso para gram	1. Se extiende en portalaminas con el isopo 2. Se fija por calor con mechero u OH 3. Cristal violeta (1 min), se enjuaga, Lugol, se enjuaga, Acetona (10 seg), Zafranina, enjuagar en cada paso POSITIVO morado NEGATIVO zafranina Se puede con todos los especímenes, heridas, raspados conjuntivales y con muy pocas bacterias
Preparación de extensiones	No muy débil ni grueso Microscopio 40x
Crecimiento óptimo	Temperatura 37°C pH Humedad Nutrición Sales Siembra por dilución 3 ó 4 zonas depende de la microbiota
Medios de cultivo	-Sólido -Semi sólido -Líquido--> es el mejor porque los nutrientes están libres (se contamina más fácil) Sangre y chocolate necesitan oxígeno
Proceso de cultivo	1 Selección del medio 2 temperatura y atmósfera de incubación 3 cual de los aislamientos requiere caracterización posterior 4 Pruebas de identificación y antibiograma Del medio menos a más selectivo (excepto Nesisseria)
Tipos de medios	Enriquecimiento: nutrientes especiales Diferenciada: tiene indicador de pH Selectivo: inhibe organismos que no interesan
Gram+	Agar sangre con azida de sodio
Gram -	Agar Mb Mckonckey
Agar Müller Hinton	Antibiograma, si es resistente o susceptible
Temperatura	La mayoría mesofilicas 37 grados Campylobacter 42 grados
Pruebas primarias	Se hacen de rutina siempre Coagulasa Catalasa Oxidasa
Antibiograma	Dilucion en disco Dilucion en agar Dilución en caldo: macro tubo grande Micro como en ELISA RESULTADOS halo grande: sensible, dosis recomendadas de antibiótico Halo pequeño: resistente
Hemocultivo	Infección en sangre. Se recolecta en botellitas (BACTEC) Si hay crecimiento, se detiene, se inocula, se identifica al organismo SE REQUIEREN 3 botellas para especificidad y sensibilidad alta
Maldi tof	Identifica organismos mediante lípidos

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