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qué hace la nucleasas de dedos zinc
son enzimas de restricción artificiales que reconocen las secuencias normales de los dedos de zinc y la cortan

usando una fusión del dominio de 200 de Unión al ADN con un dominio de ruptura de ADN (no tan esencial esto último de entender ahora)
qué hace la nucleanzas de tipo activadores de transcripción
revisar
reconocen promotores específicos y por lo tanto son regulados por estos mismos
qué hace la nucleasas de secuencias palindromicas repetidas inversas (crispr-cas)
las secuencias palindrómicas remedias inversas se unen a la nucleasa de tipo cas
qué es la edición de genomas
tipo de ingenieria genética dónde se manipulan directamente las secuencias del genoma en sitios especificos
qué es una enzima de restricción
aquella que puede reconocer una secuencia características de nucleótidos dentro de una molécula de ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado sitio o Diana de restricción, o en un sitio no muy lejano a este
en qué se diferencian las enzimas de restricción y la tecnología de edición de genomas
la primera corta en lugares ya indicados, secuencias específicas, y la segunda son sitios específicos
cómo repara una encima de restricción natural
luego dejar los extremos cohesivos digiere la hebra simple y elimina los sitios de restricción generando modificaciones.

esto también lo puede realizar la polimerasa
qué acciones realizan de forma general las tecnologías manipulación de la edición de genomas
cortan el ADN en ambas cadenas en secuencias específicas y únicas en un genoma y luego realizan un proceso de reparación por recombinación homóloga o no homóloga
que tipo de reparaciones existen
la medida de micro homólogamente o no homólogamente o la de una creacion de un templado que es más simple
qué ocurre en la reparación mediante microhomología o no homologíca
reparación imperfecta produce inserciones o eliminaciones por lo que producen interrupción del gen, lo que produce q los trasposones saltan.

la eliminación puede ser eliminando los extremos cohesivos y juntando lo restante

o haciendo copias de estos extremos cohesivos y juntándolos con los ya existentes y la hebra en sí
qué ocurre en el tipo de reparación mediante un templado
es un tipo de reparación más eficaz que mediante la tecnología actual se puede insertar en este lugar preciso
Por qué se dice que el sistema cris-cas es un sistema natural
sistema de defensa de las bacterias contra agentes foráneos
cuál es la nucleasa cas que se ocupa naturalmente
la del tipo 9
cómo se encontró la funcionalidad del Cris cas
observando que un 40% de las bacterias y arqueas tenían en su ADN secuencias de fagos o sea secuencias de virus que ocupaban como sistema inmune
cómo las bacterias ocupan la secuencia de fago como sistema inmune
al tener en su ADN estas secuencias, las bacterias pueden reconocer el ARN entrante del virus y cortarlo en conjunto a la nucleasa cas correspondiente
cómo se está copiando el sistema del pseudo llamado sistema inmune de las bacterias
se hace un ARN guía que inserta o modifica en un punto mediante una nucleasa ( duda en lo último)
diferencia entre la endonucleasa cas y la enzima restricción
la encima de restricción corta cualquier la secuencia palíndrome y la enzima cas corta una secuencia dirigida por un arn que le acompañe
cómo se originan los espaciadores
se originan por previa exposición a fagos
qué son los espaciadores
son secuencias cortas en el ADN, también llamados dna espaciadores, qué se encuentran entre repeticiones

reconocen secuencia específicas y guían a las nucleasas cas para cortar y degradar esos elementos genicos exógenos de una manera analógica al "risc" en sistemas eucariontes
de qué consta el ARN guía
de una región variable y una región constante
qué es la región constante del ARN guia
(tracrRNA) región complementaria a las regiones variables (crRNA)

importante dado que tiene una secuencia de Unión a la nucleasa cas9
qué es la región variable del arn guia
región complementaria al gen interes

tiene región adyacente llamado"PAM" , .
qué es el motivo PAM?
motivo de 2 a 6 pares de bases que se encuentran inmediatamente después del gen de interés. su secuencia depende del tipo de bacteria de la que se aísle. ocupada para cortar inmediatamente dónde se encuentre

con la nucleasa 9 provocan la ruptura doble cadena a los tres pares de bases aguas arriba de la descrita

cómo funciona la creación del complejo cas-arn con el dna foraneo
( lo de acontinuacion será copiado)
en el propio genoma del sistema bacterial se encuentra en la región constante

seguido en la secuencia la nucleasa cas

seguido de la primera región variable dónde encontramos inmediatamente después el gen de interés

seguido por otras regiones variables y otros genes

Aunque de igual manera al final se aislará el gen de interés unido al a la región variable y la región constante, donde esta última se unirá a la nucleasa correspondiente.

luego siendo llevada al ADN foráneo donde se realizará el corte para eliminar/modificar/insertar gen
nuestro ARN creado se puede soltar en cualquier parte del genoma virual?
la secuencia objetivo tiene que estar seguida inmediatamente río abajo por una secuencia pam cinco prima NGG