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cuales son los inmunoensayos con anticuerpos marcados
inmunocromatografia
enzimainmunoanalisis (eliza )
inmunofluerecencia
Inmunoblot
Citometria de flujo
cuales son los inmunoensayos con anticuerpos no marcados
prueba de aglutinacion
prueba de floculacion
Pruebas de presipitacion
Inmunodifusion
que es la inmunocromatografia ?
Es una tecnica de inmunodiagnostico de flujo lateral cualitativa en la que los anticuerpos reconocen un antigeno , un ejemplo es la prueba de embarazo , en la cual los anticuerpos reconocen la GCH en la orina.
como se dan las reacciones en la inmunocromatografia '
1.zona de muestra
2. zona de reaccion : anticuerpos marcados con enzima
3 zona de prueba : otros anticuerpos que reconocen al antigeno con el anticuerpo marcado
4. zona de control
que es el Eliza
es un inmunoensayo que usa anticuerpos con enzimas : peroxidasa y fosfatasa alcalina sobre muestras de suero , es una prueba semicuantitatica , ya que da concentraciones exactas , atravez del cambio de color , lector elisa (electrofotometria)
Que tipos de pruebas ELISA Hay
elisa directo : antigeno
elisa indirecto : anticuerpo
elisa tipo sanwich (captura): antigeno
como se hace un elisa indirecto ?
en cada poso hay un antigeno de superficie , se agrega albumina para bloquear los espcios vacios , se agrega la muestra , si estan los anticuerpos se da la reaccion, se hacen lavados , la reaccion debe mantenerse fija , se agrega el segundo anticuerpos ( con enzima )- lavado - se agrega sustrato con cromogeno
Cual es la funcion del cromogeno en el elisa indirecto ?
el cromogeno esta unido al sustrato y cuando la enzima actua sobre el sustrato el cromogeno da un producto coloreado
como funciona el lector elisa
LEE las señales de luz o de color de cada poso , luego mediasnte un sofware
que es la nefelometria
es una tecnica que mide la concentracion de particulas suspendidas o disueltas basandose en su capacidad para dispersar la luz , se usa para determinar concentraciones de anticuerpoes en suero
como se realiza el proceso de nefelometria ?
1. fuente de luz : lacep o fotometro de luz monocromatica
2 la muestra se coloca en una celda transparente
3 dispercion de la luz
4 detector : mide la intensidad de la luz dispersada , angulo de 90 grados
5 se hace una analisis baado en comparacion con estandares
que es la prueba elisa de captura
en el elisa indirecto se detecta la union del anticuerpo con el antifeno , aqui se usa un par de anticuerpos para capturar y detectar el antigeno
En que consiste la quimioluminiscencia ?
sirve para detectar antigenos p anticuerpos , citoquinas, mide la emision de radiacion electromagnetica producida por una reaccion quimica
en que consiste la inmunofluerencencia
en este caso , los anticuerpos / antigenos no se marcan con colorantes ni enzimas , sino con compuesto flurecente llamado fluorocromo
que es la fluerecencia ?
capacidad de una molecula para emitir luz al exponerse a radiaciones de baja longitud de onda
que es la inmunofluerescencia directa
detecta antigno , mediante anticuerpo marcado con fluorosceina (que es un flurocromo)- la muestra debe contener celulas , aspirado nasofaringeo
que es la inmunofluerescencia indirecta
a deteccion de anticuerpos mediante el uso de antigenos, suero
que tipos de flurocromos hay ?
isotiocinato : verde - absorve menos
rodamina : rojo- absorve mas
que se puede determinar con la IFD?
diagnostico de virus de la rabia y virus respiratorios
que se puede diagnosticar con elisa de captura ?
VIH
Artritis reumatoide- factor reumatorideo - anti ccp
que se puede diagnosticar con quimioluminicencia ?
alergias
hepatitis
IgG - Helicobacter
moleculas inflamatorias -citoquinas
funcion tiroidea
marcadores tumorsles
diabetes
anemia
que se pued ediagnosticar con IFI
SIFILIS
anticuerpos antinucleares - E. autoinmunes
tecnicas para deteccion de autoanticuerpos ?
IFI
ELISA
en que cosnsite la citometria de flujo ?
permite medir y analizar las cracteristicas fisicas y quimicas de particulas de suspencion y celulas se basa en la deteccion de la luz que y la fluorecencia (generadas por fluorocromos ) generada por ellas
que se puede determinar mediante la citometria de flujo ?
linfocitos t : anticuerpos anti CD3 Y CD4 (fluerecentes ) anti CD8
que caracterisitcas de la celula determina la citometria de flujo?
1. FSC : forward scatter : tamaño de las particulas
2. ssc : side scatter : granularidad (citoplasma
3. anticuerpos monoclonales
que es el DOT -PLOT
es un histograma que se genera con la citometria de flujo y que por medio de la complejidad del citoplasma puede determinar las poblaciones de los mononuceares
que moleculas se pueden detectar mediante la citometria de flujo
extracelulares : proteinas secretadas
superficie : pared celular
citoplasmatico
nucleares
aplicaciones clinicas de l acitometria de fluko
fenotipificacion de leucemias y linfocitos
recuento LT
deteccion de microorganismos
deteccion de citoquinas intracelulares
ciclocelular