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Dónde aislar
En función de las condiciones del mo: medio natural, animales, plantas, plantas depuradoras de aguas residuales, materiales en descomposición, colecciones de cultivo.
Cómo aislar
Separar mo e individualizar de otros: banco de diluciones + siembra en medio de cultivo apropiado o agotamiento de asa en medio selectivo/diferencial.
Cómo seleccionar los microorganismos de interés
En función de la característica buscada (enzima, metabolito o característica metabólica) se diseña un proceso de selección apropiado.

Ej.: mo productor de antibiótico o mo superproductor de aminoácido
Desventajas de la selección diseñada
Demasiado número de muestras que analizar en la industria.

Actualmente, automatizado: basado en el cultivo en el interior de un liposoma para crear microcolonias y se estudia la característica deseada mediante fluorescencia.
Finalidad de la conservación de microorganismos
- Conservar viabilidad de las células.
- Conservar propiedades industriales.
- Mantener la pureza de los cultivos.
Tipo de conservación
- Periodos cortos: resiembras.
- Periodos largos: preservación de las cepas.
Función de las colecciones de cultivos tipo (ej.: CECT):
- Recolección, conservación y suministro de cepas.
- Obtener datos de las cepas para difundirlos.
- Guardería de cepas.
- Depósito de cepas.
- Identificación de cepas.
- Investigación en taxonomía.
- Cursos de mantenimiento, conservación e identificación de cepas.
Métodos de conservación a largo plazo
Criocongelación
Liofilización
Desecación
Consideraciones generales de la conservación
NO existe ningún método óptimo para todos los microorganismos.
Mejor tipo de conservación en función del tipo celular
Bacterias: liofilización
Cianobacterias: desecadas / nitrógeno líquido.
Virus: nitrógeno líquido.
Hongos filamentosos y levaduras: liofilización / criocongelación.
Protistas: resiembra.
Criocongelación
Eliminación del agua disponivle para reducir el metabolismo hasta anularlo.
Tipos: -30, -80, -196.
Problemas + solución criogelación.
Problemas: formación de cristales/desecación de la célula.
Solución:
- Soluciones con un mínimo de sales.
- células en crecimiento exponencial y alta UCF.
- inducción de la formación de esperas previa.
- agentes crioprotectores (glicerol)
- Congelación gradual.
- Menor temperatura de almacenamiento posible.
- Descongelación rápida.
Agentes crioprotectores
Evitan que se formen cristales de agua y de sales, y favorece la formación de estructuras vítreas. Caracteristicas:
- No deben ser tóxicos.
- Deben ser permeables a la mp.
- Afinidad por los electrolitos.
Ventajas + desventajas de Criocongelación + recomendaciones.
Ventajas:
- Estabilidad genética y fenotípica.
- Pureza.
Desventaja: mantenimiento en baja temperatura de forma constante.
Recomendación: varias alicuotas de los cultivos + utilizar criobolas para facilitar la viabilización.
Liofilización
Congelación y sublimación del agua de la muestra (eliminación completa) para ralentizar el metabolismo.
Suspensión celular con alta UFC, crioprotector no viscoso, alicuotas, congelación, liofilizador, sellar al vacío, almacenar a T1 ambiente.
Ventajas liofilización
- Estabilidad genética y fenotípica.
- Viabilidad y pureza.
- Almacenamiento y transporte.
- Muy versátil.
Desecación
Eliminar el agua por evaporación o absorción: soporte absorbente, vacío o corriente de aire seco.
Solo para mo sensibles.
Métodos: desecación en gel de sílice, tierra, discos de papel, leche descremada/alimidón/dextranos.