3 tipus de metodes	quimic 6<br /> fisic 3<br /> biologic 1
llista met quimics	1. lipids cationics<br /> 2. fosfat calcic<br /> 3. polimers cationics<br /> 4. DEAE-dextrà<br /> 5. dendrímers activats<br /> 6. transfecció mitjançada x imants
metodes transfeccio fisics	1. electroporació<br /> 2. miceoinjecció<br /> 3. transport biolitic de particules
LIPIDS CATIONICS: formats x 2 parts, quines? quina forma agafen?	1 cao carregat + que interacciona amb el DNA i una cua liposoluble.<br /> <br /> formen esferes, la part lipidica a l'interior i els caps a l'exterior formen una bicapa, formen vesícules anomenades LIPOPLEXES.
LIPIDS CATIONICS : Quins són els més utilitzats??	DOPE<br /> DOTMA<br /> DOTAP
avantatges 8 i inconvenients 2 dels Lipids cationics	INCONVENIENTS:<br /> - no aplicable a tots els tipus de cells<br /> - baixa eficiencia en la majoria de cultius cells<br /> <br /> AVANTATGES:<br /> 1. Transport A.nucleics molt eficient.<br /> 2. fàcil us i poques etapes<br /> 3. aplicable a un gran num de cells eucariotes<br /> 4. es pot fer transferemcia d edna i rna in vivo a animals i humans.<br /> 5. baixa toxicitat<br /> 6. transport eficaç de dna a totws les mides des d'oligonucleotids a cromosomes artificials de llevat.<br /> 7. llarg periode estabilitat<br /> 8. proteccio de la degradacio d'a.nucleics
FOSFAT CALCIC<br /> Com el creem? tipus introducció a la cell?	es transfereix x fagocitosi.
FOSFAT CALCIC<br /> Avantatges 4 i incivenients 5	AVANTATGES<br /> -Barat<br /> - aplicable rang ampli<br /> -transfeccions estables i transitoriew<br /> -fosfat calcic protegeux el dna de les nucleases<br /> <br /> INCONVENIENTS<br /> -baixa eficiencia<br /> -toxic, no invivo<br /> -mida i qualitat del precipitat és critic <br /> -sensible a petits canvis de pH,T i [tampó]<br /> -frequencia baixa
POLIMERS CATIONICS<br /> D'on provenen? Com són? exemples	Són l'evolució dels lipids cationics q han perdut la part lipidica, són moleculew altament ramifocades amb branquew q acaben amb xàrreguew + q això les fa molt solubles i capten fàcilment el DNA<br /> <br /> Exemples: PEI (polietileneimina, DEAE (dextrà) polibrene
POLIMERS CATIONICS<br /> Avantatges i inconvenients	AVANTATGES:<br /> -baix cost<br /> - molt eficient<br /> - senzill i ràpid<br /> - aplicacle a un rang ampli de tipus cell<br /> <br /> INCONVENIENTS:<br /> - [DEAE-dextrà] altes és tòxic<br /> - eficiencia depen del tipus cell<br /> -només transfeccions transitories<br /> -eficacia baixa en cells 1a
DENDRIMERS<br /> Com són? amb q podem jugar??	són macromolecules molt ramificades i globulars. <br /> en les ramificacions trobem càrregues + q formen complexes amb el DNA.
DENDRIMERS AVANTATGES I INCONVENIENTS	avant: estables a fluids biologicw i no sensibles a la T, alta eficiencia de transfecció<br /> <br /> inconven: no biodegradables, tòxics
MAGNETOFECCIÓ<br /> Com ho fem? 4 avantatges i 1 inconv	fusionem el material genètic amb nanoparticules magnetiques, les posem en un cultiu celk i les movem anb un imant<br /> <br /> avant: rapid, alta eficiencia, es pot fer en presencia de serum, tassa alta transfecc<br /> <br /> inconv: requereix cells adherents, les cells en syspe req centrifugació o immobilització
ELECTROPORACIÓ<br /> Q és?	ús pols electric x crear porus de manera transitoria a la MP x on entraran els à.nucleics.
ELECTROPORACIÓ<br /> <br /> AVANT I INCONV	avant: ràpid barar, no altera estructura biologica, fàcil, alta eficiencia, estable i transitoria<br /> <br /> inconv: mortalitat cell i baixa ef en cultiys 1a.
cells squeezing q és??	tecnica microfluida q xonsisteix en deformar mecanicament les cells fent-les passar x una constricció entre el 30-80% + petites q el diametre celular.<br /> dp cal tractar les cells amb medi auplementat pq es recuperin
helios gen gun	projecció de particulww microscopiques de metalls pesants AU o W recobertes d'à. nucleics a l'interior de cells amb un instrument biolistic.<br /> es pot usar en cells en divisió o quiescents, tant en vivo com en cultius
MICROINJECCIÓ Què és? quina limitació té?	el transport d'a.nucleics al citoplasma o al nucli es fa amb una agulla o micropipeta. Està limitat a aplicacions EX VIVO a oocits
MICROINJECCIÓ AVANTATGES I INCONVENIENTS	AVANTATGES: freq integració establei molt superior a la resta, molt efectiu, DNA sotmes a poques modificacions, INCONVENIENTS: NA a cells amb paret, car i personal ben entrenat
TRANSDUCCIÓ. Què usa? quantes cells necessitem? quin problema hi ha?	la transducció usa VIRUS. calen 2 cells hostes una per sintetitzar virus i la que infectem amb els virus. Problema que la cell es lisa.
en la RTRNASDUCCIÓ: es modifica l'ADN del virus? on està la seq que eliminem?	Si pq no pugui produir infeccions. L seq essencial x crear virions es troba a l'interior de la sequencia.
Què posem a la 1a cell a infectar?	2 plasmidis: - 1 plasmidi amb la seq del virus modificada on trobem el gen d'interés - 1 plasmidi amb la sequencia x a les proteines essencials del virus.
què passarà quan es trandueixi aquest virus a la 2a cell hoste?	el plasmidi no tindrà la seq essencial del virus x fer virions sino que tindrà el gen d'interès i per tant no podrà produir la lisis de la cell.
quins 4 tipus de virus fem servir? sempre introdueixen ADN al mateix lloc?	1. adenovirus 2. adenoassociats 3. retrovirus 4. lentivirus

Descubre

Crear Tarjetas

Acerca de Nosotros

Explore Tarjetas

Comparta este Set de Tarjetas de Aprendizaje

Tarjetas de Aprendizaje relacionadas

T4 Metodew De Transfecció

Cómo estudiar sus tarjetas

Rango de Cartas a estudiar

24 Cartas en este set